Le Service d'imagerie et de microscopie avancées (SIMA) est un service rattaché à l'Institut des technologies biomédicales (ITB) et à l'Université de La Laguna (ULL). Son objectif est de fournir aux groupes de recherche de l'ULL, aux organismes publics et privés, ainsi qu'aux entreprises locales et nationales, l'équipement et le soutien technique nécessaires à la réalisation d'expériences de microscopie avancée (épifluorescence, microscopie confocale, contraste de phase et de Normarski, FRAT, FRET, etc.), sur des échantillons fixés et des cellules vivantes. Il vise également à faciliter l'analyse et la quantification des images de microscopie produites par les utilisateurs.
- Microscopie à fluorescence conventionnelle.
- Microscopie à super-résolution (STED et dSTORM)
- Détection des marquages immunocytochimiques à l'aide d'anticorps marqués par un fluorochrome dans les cultures cellulaires et les coupes histologiques.
- Hybridation in situ avec des sondes fluorescentes (FISH)
- Obtention de micro-échantillons à partir de coupes histologiques par microdissection laser.
- Analyse cellulaire in vivo et en temps réel grâce à l'utilisation de marqueurs fluorescents et/ou de protéines de fusion et de leurs dérivés, dans des conditions de température et d'atmosphère contrôlées.
- Études de colocalisation, internalisation et trafic intracellulaire.
- Analyse physiologique de la réponse au Ca2+.
- Étude des interactions protéiques à l'aide de la technique FRET (Transfert d'énergie par résonance de fluorescence)
- Étude du transport des protéines à l'aide de la technique FRAP (Récupération de fluorescence après photoblanchiment)
- Détermination des spectres de fluorescence (balayage Lambda)
- Traitement et quantification d'images avec des programmes spécialisés : LAS X, déconvolution de Huygens, ImageJ/Fiji.
SIMA effectue également d'autres tâches telles que :
- Maintenance et coordination de l'utilisation des différents microscopes appartenant au Service.
- Assistance technique pour l'utilisation des microscopes et des logiciels de traitement d'images à destination du personnel non formé.
- Formation obligatoire pour les travailleurs indépendants.
- Conseils et assistance technique aux utilisateurs.
- Réalisation de procédures expérimentales.
- Préparation de l'échantillon.
MICROSCOPE CONFOCAL OLYMPUS FV1000 :
- Microscope inversé Olympus IX81, avec platine XY motorisée.
- 3 PMT (détecteurs photomultiplicateurs)
- 1 détecteur de lumière transmise.
- Lampe à mercure pour fluorescence.
- Chambre d'incubation avec contrôle de la température et du CO2 pour les cellules vivantes.
- Objectifs : 10X/0,3 NA, 20X/0,75 NA, 40X/1,30 NA et 60X/1,35 NA.
- Filtres de fluorescence pour DAPI, FITC et TRITC.
- Lignes laser : diode laser 405 nm, laser argon multi-lignes 458/488/514 nm, laser hélium-néon vert 543 nm et laser hélium-néon rouge 633 nm.
- Système de numérisation 4096×4096.
- Vitesse de balayage de 4 images/seconde à 512×512.
MICROSCOPE À ÉPIFLUORESCENCE DIRECTE LEICA DM 4000B :
- Objectifs 5X/0,15 NA, 10X/0,30 NA, 20X/0,5 NA, 40X/0,75 NA et 100X/1,30 NA pour l'immersion à l'huile.
- Logiciels d'analyse d'images Q-Win et Q-fluoro.
MICROSCOPE CONFOCAL LEICA TCS SP8 :
- Microscope inversé DM6000, avec platine XY motorisée et platine Z galvanométrique.
- 4 détecteurs : 2 tubes photomultiplicateurs PMT et 2 détecteurs hybrides de type HyD (PMT+GaAsP)
- 1 détecteur de lumière transmise.
- Lampe à halogénures métalliques pour fluorescence.
- Chambre d'incubation avec contrôle de la température et du CO2 pour les cellules vivantes.
- Objectifs : 10X/0,40 NA, 20X/0,70 NA, 40X/0,85 NA, 40X/1,30 NA et 63X/1,40 NA.
- Filtres de fluorescence pour DAPI, FITC et TRITC.
- Lignes laser : diode laser 405 nm, laser argon multi-lignes 458/488/514 nm, diode laser 561 nm et laser hélium-néon rouge 633 nm.
- Système de numérisation haute résolution 8192×8192 ; (x) vitesse de numérisation de 4 images/s à 512×512.
- Logiciel LAS AF avec modules pour la colocalisation FRET et FRAP.
SYSTÈME DE MICROSCOPIE À SUPER-RÉSOLUTION PAR APPAUVRISSEMENT D'ÉMISSION STIMULÉE (STED) COUPLÉ AU MICROSCOPE TCS SP8 :
- 2 lasers STED haute puissance (>1,5 W) avec des longueurs d'onde de 592 nm et 660 nm, pour l'appauvrissement.
- Couplage optique utilisant une fibre optique ultra-précise avec “ filtre de phase Votex ” et polarisation optique pour une amélioration de la résolution, optimisation PSF nulle.
- Rack intégrant laser STED, commande électronique et modulation optique (AOTF)
- Intégration au logiciel confocal LAS X.
- Mise en œuvre d'un logiciel de déconvolution avec des algorithmes spécifiquement dédiés aux images STED.
- Logiciel de déconvolution, de visualisation et d'analyse d'images STED et confocales.
- Cible optimisée pour les applications STED, PLAN APO 100x/1.40 Huile blanche STED.
- Module STED 3D.
- Table anti-vibration active.
- Table optique active.
UNITÉ DE MICROSCOPIE À RÉFLEXION INTERNE TOTALE (TIRF) COUPLÉE À L'ÉLECTROPHYSIOLOGIE ET À LA SPECTROSCOPIE.
- Système d'électrophysiologie complet (patch-clamp, Axon/Molecular Devices) couplé à un microscope TiU équipé d'un module TIRF, d'un système DMD, d'un éclairage LED SpectraX (Lumencor) avec des jeux de filtres pour toutes les longueurs d'onde disponibles dans des tourelles de filtres motorisées.
- Système d'imagerie composé d'une caméra EMCCD Andor IXON, couplée à un spectrographe ACTON avec réseaux de diffraction et miroir.
- Interface NiDAQ, logiciel MicroManager et NIS-Elements (NIKON)
- Système couplé à deux dispositifs de perfusion possibles, l'un ultra-rapide (systèmes multicanaux) et l'autre conventionnel (systèmes ALA).
SYSTÈME DE MICRODISSECTION LASER LEICA AS LMD.
- Équipement standard complet pour la réalisation de microdissections par capture laser afin d'isoler des régions ou des cellules d'intérêt.
| SERVICES OFFERTS | PRIX (€) | ||
| ITB | COMPLET | GÉNÉRAL | |
| Observation, analyse et image | |||
| Leica SP8 | 15 | 20 | 25 |
| Olympus FV 1000 | 10 | 15 | 20 |
| Microscopie conventionnelle/à fluorescence | 7 | 12 | 15 |
| Informatique | – | – | – |
| Traitement et analyse d'images/heure | 12 | 20 | 35 |
| Autres fonctionnalités | – | – | – |
| Assistance technique/heure | 11 | 16 | 22 |